小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3

簡要描述：青旗（上海）生物技術(shù)發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺，在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對用戶負責(zé)的態(tài)度，以對科研的高度嚴謹，以嚴格的質(zhì)量控制，為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)！

更新時間：2021-05-28

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號	BFN608006388
規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	僅供科研	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

細胞名稱	小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3
貨物編碼	BFN608006388
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	37℃	-198℃
運輸方式	常溫保溫運輸	干冰運輸
安全等級	1
用途限制	僅供科研用途 1類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞是從NIHSwiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進行轉(zhuǎn)化分析的亞株，建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞克隆。該細胞株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感，對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。又名3T3細胞。
注釋	Mus musculus (Mouse) (NCBI Taxonomy: 10090) Breed/subspecies: Swiss albino.
STR信息	/
參考文獻	PubMed=1052771; DOI=10.1016/S0092-8674(75)80001-8 Rheinwald J.G., Green H. *Serial ction of strains of human epidermal keratinocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells. Cell 6:331-343(1975)**

驗收細胞注意事項

1、收到小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。

2、收到小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當(dāng)方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。

6、24 小時后，小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。

特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。

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